耗材专区 ezseptm max固相萃取柱应用于牛奶中碘醚柳胺残留量的检测-必一运动

本文参照《动物性食品中碘醚柳胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（征求意见稿）》，利用ezseptm max固相萃取柱（60 mg/3ml，货号：pz12802）净化样液，再通过高效液相色谱串联质谱仪进行检测，建立了一种对牛奶中碘醚柳胺残留量进行分析的方法。

关键词：

牛奶，碘醚柳胺，固相萃取

1 实验过程

1.1仪器与试剂   

mprep-spe08手动固相萃取装置，货号：pz0008，北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

e.t.氮吹浓缩仪，货号：c020017，北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

4500质谱系统，sciex公司；

ezseptm max固相萃取柱（60 mg/3ml，货号：pz12802），北京莱伯帕兹检测科技有限公司；

冷冻离心机，gl-20g-ⅱ，上海安亭科学仪器厂  ；  

甲醇（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司；

乙腈（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中国）有限公司；

甲酸、氨水、三乙胺等化学品均为分析纯或以上规格，购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2   工作液配制

碘醚柳胺标准物质：100mg/瓶，购自坛墨质检标准物质中心。

碘醚柳胺标准储备液：取碘醚柳胺标准品适量（相当于有效成分约10mg），精密称取，用乙腈稀释至10ml容量瓶中，配制成浓度为1000μg/ml的碘醚柳胺标准储备液。

碘醚柳胺标准中间液：移取碘醚柳胺标准储备液0.1ml，用乙腈稀释至10ml容量瓶中，配制成浓度为10μg/ml的碘醚柳胺标准中间液。

碘醚柳胺标准使用液：碘醚柳胺标准中间液0.1ml，用乙腈稀释至10ml容量瓶中，配制成浓度为0.1μg/ml的碘醚柳胺标准使用液。

依次移取0.1μg/ml的碘醚柳胺标准使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中用甲醇定容至刻度，得到浓度依次为0.2μg/l、1μg/l、5μg/l、20μg/l、50μg/l的标准系列工作液。

1.3 实验部分

1.3.1 样品制备

 取牛奶试样2g，置于50 ml聚丙烯离心管中，加10.0 ml 1%三乙胺乙腈溶液超声提取10 min，8000 r/min离心5 min，收集上清液至另一50 ml离心管中，向残渣中加入8.0 ml 1%三乙胺乙腈溶液，重复提取一次，合并两次上清液，用乙腈定容至20 ml，混匀，待净化。

1.3.2 固相萃取净化 

ezseptm max固相萃取柱（60 mg/3ml，货号：pz12802）用5ml乙腈进行活化，取1.3.1待净化液5.0 ml上样，上样结束后用5ml乙腈淋洗萃取柱，再用5ml 5%甲酸乙腈洗脱萃取柱，收集洗脱液，使用e.t.氮吹浓缩仪在45℃下氮气浓缩至近干，加2.0 ml甲醇涡旋混匀，过微孔滤膜后供lc-ms/ms测定。

1.3.3 lc-ms/ms仪器条件

色谱柱：kinetex luna pfp（2.6μm，3*100mm）

检测方式：多反应监测（mrm）；

流动相：a:0.1%氨水水溶液  b: 甲醇

流速：0.3ml/min

进样量：5μl

表1流动相梯度洗脱表

2 实验结果

图1 标液色谱图

图2 碘醚柳胺标准曲线

3 结论 

本实验使用ezseptm max固相萃取柱（60 mg/3ml，货号：pz12802）对牛奶中碘醚柳胺进行净化，通过高效液相色谱串联质谱仪进行测定，该方法的加标回收率范围89.6%~95.3%，rsd为2.3%，能够满足标准要求。也说明ezseptm max固相萃取柱（60 mg/3ml，货号：pz12802）能很好的完成方法中的净化工作，结果稳定、可靠。

参考文献

[1] 《动物性食品中碘醚柳胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（征求意见稿）》

表 2   加标回收率